Praćenje i verifikacija rezultata dezinfekcije i sterilizacije vodikovim peroksidom u biološkim kabinetima

Nakon upotrebe vodonik peroksida (posebno isparenog vodonik peroksida VHP) za dezinfekciju i sterilizaciju u biološkim kabinetima, rigorozno i ​​naučno praćenje i provjera rezultata jedini su način da se potvrdi efikasnost sterilizacije, kao i osnovni zahtjevi za kontrolu kvaliteta i usklađenost sa propisima. Ovo nije samo proces 'pokreni uređaj', već proces zatvorene petlje-za koji je potrebno više fizičkih, hemijskih i bioloških dokaza.
Slijedi sistematska analiza tehnika praćenja i validacije.
Osnovni princip: Trostruki sistem verifikacije
Potpuna validacija bi trebala uključivati ​​"praćenje parametara procesa", "hemijske indikatore" i "testiranje izazova biološkim indikatorima", koji se međusobno nadopunjuju i neophodni su.

Ovo je prva linija odbrane za verifikaciju, koja uključuje-snimanje ključnih fizičkih i hemijskih parametara u realnom vremenu putem senzora uređaja, čime se dokazuje da ciklus sterilizacije radi u okviru postavljenog i efektivnog raspona parametara.
Parametri praćenja:
Koncentracija pare vodikovog peroksida (ppm): najkritičniji parametar. Mora se postići i održavati na unaprijed određenoj ciljnoj koncentraciji (npr. stotine ppm) u dovoljnom vremenskom periodu. Niska koncentracija može dovesti do neuspjeha sterilizacije.
Relativna vlažnost (% RH): kontrolirana na niskom nivou (obično<40%) to ensure that VHP is in an efficient "micro condensation" state rather than large droplet condensation. Excessive humidity can dilute disinfectants and may damage equipment.
Temperatura: Pratite temperaturu komore, koja utiče na pritisak zasićene pare i proces kondenzacije.
Pritisak/protok vazduha: Uverite se da je komora zapečaćena i da je cirkulacija gasa normalna.
Vrijeme izlaganja: Trajanje održano na ciljnoj koncentraciji.
Kako izvršiti:
Automatski kompletiran senzorima i kontrolnim sistemom ugrađenim u VHP generator.
Ključni zahtev: Oprema treba da bude u stanju da generiše i pohrani kompletne ciklične grafikone podataka (kriva vremena koncentracije, kriva temperature i vlažnosti), koji treba da budu uključeni kao deo izveštaja o validaciji. Svako odstupanje parametara od unaprijed postavljenog raspona trebalo bi rezultirati alarmom ili prekidom petlje.

Koristi se za brzo i intuitivno utvrđivanje da li je neki predmet izložen okruženju za sterilizaciju vodikovim peroksidom i može indirektno odražavati da li je doza dovoljna.
Tip i princip:
Kartica hemijskog indikatora tipa etikete: Sadrži boje osetljive na vodonik peroksid. Kada se akumulira dovoljna količina doze vodikovog peroksida (koncentracija x vrijeme), dolazi do nepovratnih promjena iz jedne boje u drugu.
Mjesto postavljanja: Treba ga postaviti na najteže dostupno mjesto za sterilizaciju, kao što su:
Najdublji ugao radnog prostora sigurnog ormarića.
Unutar odvodnog kanala.
Spoj između filtera i instalacionog okvira (ako je moguće).
Unutrašnja izduvna cijev (ako je pokrivena dezinfekcijom).
Funkcija i ograničenja:
Funkcija: Pruža trenutne rezultate za brzo oslobađanje; Potvrdite da je para distribuirana na određeno mjesto; Kao identifikator za razlikovanje između "obrađenih" i "neobrađenih" stavki.
Ograničenja: Može samo dokazati izloženost, ne može dokazati sterilnost. Promjena boje samo ukazuje da je dostignut prag minimalne doze, ali ne garantuje ubijanje svih mikroorganizama.

Ovo je zlatni standard verifikacije i odlučujućih dokaza. Korištenjem standardiziranih mikrobnih spora sa poznatom visokom otpornošću, direktno se dokazuje da je proces sterilizacije dovoljan za ubijanje najteže ubijajućih mikroorganizama.
Izbor bioloških indikatora:
Standardni soj: Spore Geobacillus stearothermophilus. Ovo je međunarodno priznata standardna test bakterija s najjačom otpornošću na vodikov peroksid.
Oblik nosača: obično papirna traka obojena kapljicama suspenzije spora, lim od nehrđajućeg čelika ili instaliran na određenom nosaču.
Poznati broj spora: Svaki biološki indikator sadrži poznati broj spora, obično 10 ^ 5 do 10 ^ 6 CFU (jedinice koje formiraju kolonije).
Strategija plasmana (najkritičniji korak):
Lokacija: Mora se postaviti na "najhladnijoj tački" gdje je sterilizacija najizazovnija ili gdje je plin najteže prodrijeti. Za biološke sigurnosne ormare, preporučene lokacije uključuju:
Ispod radnog stola, u uglu kod prednje rešetke.
Spoj između zadnjeg zida i radnog stola.
Na poleđini ili u prazninama unutrašnjih instrumenata kao što su držači za pipete.
Ako opseg provjere uključuje unutrašnjost ispušnog ventila ili cjevovoda.
Količina: Koristite najmanje 3 biološka indikatora i uključite jednu netretiranu pozitivnu kontrolu.
Proces testiranja i interpretacije:
Izloženost: Izvršite kompletan ciklus VHP sterilizacije sa BI kabinetom.
Recikliranje i uzgoj:
Nakon što se ciklus završi, uklonite BI pod sterilnim uslovima.
Stavite ga u namjensku epruvetu za oporavak koja sadrži podlogu za kulturu.
Kultivisati u inkubatoru na 56-60 stepeni C 24-48 sati (određeno vreme prema uputstvu).
Istovremeno kultivisati pozitivnu kontrolu (nesterilizovanu) i negativnu kontrolu (sterilni medij za kulturu).
Tumačenje rezultata:
Provjera uspješna: Sve sterilizirane BI podloge za kulturu ostaju bistre (bez promjene boje/zamućenja), što ukazuje da spore nisu preživjele. Pozitivna kontrola mora pokazati aktivan rast (žutilo/zamućenje podloge), a negativna kontrola mora ostati čista.
Neuspjeh u verifikaciji: Svaki obrađeni BI koji pokazuje rast (žutilo/zamućenje) ukazuje na neuspjeh ciklusa sterilizacije. Potrebno je temeljno istražiti razloge (kao što su greške u parametrima, postavljanje, kvarovi opreme, problemi sa plombiranjem, itd.), prilagoditi plan i ponovo izvršiti potpunu verifikaciju.

Prva verifikacija:
Nakon ugradnje VHP opreme ili početne sterilizacije novog tipa sigurnosnog ormara, ona se mora izvršiti.
Ovo je najsveobuhvatnija verifikacija, koja zahteva određivanje 'najhladnije tačke' i uspostavljanje efektivnih parametara petlje.
Redovna provjera valjanosti:
Obično se provodi svakih šest mjeseci ili godišnje.
Koristi se za potvrdu konzistentnosti opreme, programa i operatera.
Dnevno praćenje:
Za svaki ciklus sterilizacije treba koristiti hemijske indikatore, a mape procesnih parametara treba pregledati.
Učestalost testiranja bioloških indikatora može se smanjiti prema potrebi (kao što je mjesečno ili tromjesečno), ali područja sa strogim propisima mogu zahtijevati korištenje svake serije/ciklusa.

Sve aktivnosti praćenja i verifikacije moraju biti formalno dokumentirane, a izvještaj treba da sadrži najmanje:
Informacije o opremi: model i broj VHP generatora.
Informacije o ciljnom uređaju: model biološkog kabineta, broj, lokacija.
Parametri petlje: postavljanje ciljne koncentracije, vremena, temperature i vlažnosti itd.
Grafikon podataka procesa: kriva koncentracije i vremena stvarnog rada, itd.
Hemijski indikatori: vrsta, broj serije, lokacija postavljanja, rezultati promjene boje (sa priloženim fotografijama).
Biološki indikatori: soj, broj serije, količina spora, lokacija postavljanja, rezultati kulture (u prilogu fotografija epruvete za kulturu).
Zaključak: Jasno utvrditi da li je ciklus sterilizacije efikasan.
Izvršilac i datum: Potpis operatera i recenzenta.

sažetak
Nesterilizirana sterilizacija je ekvivalentna bez sterilizacije.
Pouzdan sistem validacije za dezinfekciju i sterilizaciju bioloških ormara vodonik peroksidom je:
Osigurati kontrolu procesa kroz "mapiranje procesnih parametara", postići brzo vizualno oslobađanje putem "hemijskih indikatora" i na kraju dobiti certifikat krajnje mikrobiološke efikasnosti kroz "testiranje izazova biološkim indikatorima".
Ovaj sistem trostruke validacije je ključ za podizanje dezinfekcije vodonik peroksidom iz "operacije" u sljedivu, reproducibilnu i pouzdanu "nauku", a također je kamen temeljac za ispunjavanje zahtjeva GLP, GMP i akreditacije laboratorija za biološku sigurnost u zemlji i inostranstvu. Rukovodioci laboratorija to moraju implementirati kao obaveznu proceduru i kontinuirano pratiti.